Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中渐渐扩展

从第一次显现出来呼吸道自身抗本体到显现出来1M-乳癌药理学呕吐的重大突破所部在婴幼儿时代就有很好的揭示，多个呼吸道自身抗本体白血病的婴幼儿里有70%在血清转换后10年内患病乳癌，而随访15年的婴幼儿这一比例下降到84%。相比之下之下，占药理学1M-乳癌一半以上的M-1M-乳癌的肺癌机制还从未给与充分的研究者。

越来越多的人开始其所用于分期系统来定义1M-乳癌的重大突破：生物本体在显现出来多种呼吸道自身抗本体时转入第1阶段，显现出来血糖极其时转入第2阶段，显现出来呕吐时转入第3阶段。一些多发呼吸道自身抗本体白血病的生物本体，在1期和2期，重大突破较慢，并拓展为肺癌的1M-乳癌。我们之前揭示了一小组在首次探测到多种呼吸道自身抗本体检验后至更少10年无乳癌的极快重大突破者，这小组病患者多人更少，但不同之处并不明确。随后，我们发现呼吸道自身抗原基因表达CD8+T细胞膜反其所会在重大突破快速的病患者里基本不普遍存在，但在近期肺癌和曾一度普遍存在的乳癌病患者里很难以探测到。这可能声称，与重大突破病患者相比之下，这些病患者免疫性反其所会的恒定弱化。

现代研究者声称，尽管恒定性T细胞膜(Treg)数量但会，但乳癌病患者普遍存在一些机能缺陷，其里有数对IL-2的反其所会控制能力下降。此外，乳癌病患者里的effectCD4+T细胞膜可能对恒定更具抵抗性，表现为effectT细胞膜的抑止西移动，自然转化成的Treg和本体外转化成的可借Treg，以及抗原经历的CD4+T细胞膜里IL-2反其所会西移动。本研究者的目的是揭示了CD4+恒定性T细胞膜(Treg)在一小群极快速重大突破者里的不同之处，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法：BOX研究者是一项以人群为基础的纵向研究者，在21岁以下肺炎的病患者配偶里核对1M-乳癌的危险主因。我们之前揭示了曾一度快速重大突破者的不同之处，他们保持多重呼吸道自身抗本体白血病超过10年，但从未显现出来乳癌的药理学呕吐，慢性或非外阴免疫性。随后，10名继续保持无乳癌并想提供大量体液检验的快速重大突破者设为T和B细胞膜机能系统性。在现在的研究者里，8名慢重大突破者(SP小组)，里位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁两者之间的呼吸道自身抗本体白血病。所有的参与者都处于1M-乳癌重大突破的1期，尽管一些人随后失去了呼吸道自身抗本体对某些抗原的白血病反其所会，然而，一名病患者已经处于2期至更少6年，但从未显现出来药理学呕吐，一名病患者被诊断为乳癌，该受试者72岁，在采集实验检验时，其HbA1c升温到53 mmol/mol(7%)，在数据系统性里对该遗传物质来进行了单独评估。分离出来外周血单个核细胞膜(PBMCs)，采用多参数流式细胞膜术和T细胞膜抑止试验评估遗传物质里Treg的频所部、表M-和机能。其所用于FlowSOM和CITRUS(聚类认定、表征和回归)来进行无监督聚类系统性，评估Treg表M-。

结果：与心理健康遗传物质相比之下，来自慢重大突破本体的思绪CD4+T细胞膜的监督聚类辨识，激活的思绪CD4+ Treg频所部下降，与糖皮质激素可借的TNFR涉及蛋白(GITR)问到下降有关。一名HbA1c升温的病患者与重大突破快速者和最简单的对照小组相比之下，Treg谱有所并不相同。机能已经有，与心理健康遗传物质相比之下，来自快速重大突破本体的Treg介导的CD4+effectT细胞膜抑止明显破损。表现为对effectCD4+T细胞膜CD25和CD134问到的抑止下降。

由此可知1 了解的表M-系统性辨识，CD4+Treg亚M-在慢重大突破队列里下降。由FlowSOM转化的Treg室，聚集在来自所有遗传物质的活CD4+CD45RA -细胞膜上。根据标示出物问到认定出10个元簇:思绪T细胞膜_1;思绪T cell_2;思绪T cell_3;思绪T cell_4;CD49b思绪T细胞膜;HLA-DR + GITR +思绪T细胞膜;闪存Treg_1;闪存Treg_2;闪存Treg_3;和闪存Treg_4。(a)其所用于9个并不相同Treg标示出转化的10个元簇的MST。每个路由器均是由一个一个大(100个一个大)，更大的元一个大(10个元一个大)在路由器小组周围上色。每个路由器里的碗由此可知问到单个标示出的问到级别。(b)每个元聚类的热由此可知，以辨识整本体标示出问到。(c, d)为HD小组(c)和SP小组(d)转化由此可知，以及FlowSOM识别系统的每个元簇的覆盖层。(e-l)相较稀土元素为每个metacluster罐该线由此可知(稀土元素> 0.05%)未确定为HD和SP小组:闪存Treg_2 (e),闪存Treg_3 (f),闪存Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +思绪T细胞膜(h)、思绪T cell_1(i),思绪T cell_2 (j),思绪T cell_3 (k) n d CD49b思绪T细胞膜(l)。红色红色均是由**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对表示法秩检验。此键适用于由此可知形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

由此可知2 其所用于CITRUS的预测模M-表明，Treg频所部的下降是重大突破快速的标志。AO门控(a - f)和甜菜系统性(g-k)比较SP参与者和最简单的HD参与者在CD4+CD45RA−T细胞膜上的歧异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群本体的近现代由此可知。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR问到来进行分离出来，模拟FlowSOM群本体。(b) HD(黑点)和SP(布氏)小组以及遗传物质SP 606(红色)里CD25+ cd127的频所部汇总由此可知。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+门控三子集的罐该线由此可知;(c) HLA-DRloGITR−(闪存Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(闪存Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(闪存Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+闪存T cell)。(g - i)柑桔簇臂由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3问到强度着色，箭头突出的簇被识别系统为SP和HD队列两者之间的并不相同。(j)罐该线由此可知辨识了在SP(布氏)和HD(灰点)小组里，CITRUS思绪Treg_3和Treg_4的相较稀土元素(比例)。(k)直方由此可知辨识每个簇的表M-(深橙色)和Treg标示出相较问到与背景问到(橙色);上列，闪存Treg_3;比如说悄悄，闪存Treg_4。背景与所有其他簇里标示出的问到有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对表示法秩检验

由此可知3 与心理健康献血者相比之下，重大突破快速者思绪treg的GITR下降。每个思绪CD4+T细胞膜元簇(思绪T细胞膜_1;思绪T cell_2;思绪T cell_3;CD49b +思绪T细胞膜;HLA-DR + GITR +思绪T细胞膜;闪存Treg_2;闪存Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)探测每个问到标示出的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)队列的问到热由此可知(sp606不有数在内)。(c,d)思绪Treg_4元簇里所有HD(蓝灰色)、所有SP(橙色)和SP 606(红色)的FlowSOM GITR问到串联，辨识直方由此可知(c)和汇总由此可知(d)。Wilcoxon配对表示法秩和检验，p< 0.07(红色)所有遗传物质有数，p< 0.05(橙色)遗传物质SP 606和最简单的HD不有数在测试里。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs里GITR问到，从AO门控，从所有HD(蓝灰色)、所有SP(橙色)和SP 606(红色)串联，辨识直方由此可知(e)和汇总由此可知(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对表示法秩检验

由此可知4 来自快速重大突破的CD4+ treg细胞膜控制effectCD4+T细胞膜的控制能力下降。SP小组用橙色的该线和红色问到，HD小组用黑色的该线和红色问到，红色的该线/红色问到遗传物质sp606。其所用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞膜来进行分选。CD4+CD25−(此番者)被标示出为CFSE, Treg按观察的比例滴定。用抗CD3 /28微珠转化细胞膜，培训3天后来进行流式细胞膜术探测。(a-d)与CD4+此番者相较其所的treg培训(自本体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD此番者培训。(a,b,f) CFSE转化(a,e)和CFSE抑止倍数(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的抑止倍数。其所用于白血病对照(激活的响其所细胞膜内含treg)算出抑止倍数。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

由此可知5 effectCD4+T细胞膜对快速重大突破的T细胞膜转化的抑止更尖锐。SP小组用橙色的该线和红色问到，HD小组用黑色的该线和红色问到，红色的该线/红色问到遗传物质sp606。其所用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞膜来进行分选。CD4+CD25−(此番者)被cfsel标示出，treg按观察的比例滴定。用抗CD3 /28微珠转化细胞膜，培训3天后来进行流式细胞膜术(CD25反染)和细胞膜因三子系统性。HD Treg与HD、SP或sp606此番者共同培训。(a,b) CFSE转化(a)和CFSE抑止百分所部(b)。(c,d) CD25抑止百分所部(c)和CD134抑止百分所部(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培训里的问到。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

事实：我们得出的事实是，来自快速重大突破三子的转化思绪CD4+Treg在GITR问到里给与了扩展和丰富，重申了进一步研究者Treg在1M-乳癌安全性生物本体里的值得注意的必要性。

原文说是：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28